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ECL化學發光檢測試劑盒

時間:2017-11-27 17:05:49 瀏覽:

產品貨號:ECL001

包    裝:50 ml

 

產品特點

1、更高的靈敏度:

有別于傳統增強劑的組合式熒光增強系統,能夠有效提高實驗的靈敏度,獲得同級別發光液4-10倍的檢測信號。

2、更高的信噪比:

特殊的Genshare藍光系統,有助于實現熒光與膠片的最佳組合,獲得完美的實驗圖片。

3、更長的發光持續時間:

獨有的發光緩沖系統使熒光激發更加穩定,從而保證了發光平臺期的有效延長,讓您的實驗安排更加從容。


原理:

3-氨基鄰苯二甲酰肼是一種較強的化學發光物質,在存在辣根過氧化酶催化的條件下,可以被氧分子氧化成具有發光現象的中間體,當中間體從激發態衰變到基態時可以產生明亮的化學熒光,常用于檢測固定在膜上的蛋白質等生物大分子。其高靈敏度能夠檢測pg級別的抗原,發光信號強烈持久,可以使用照相技術(X-光膠片曝光)或者其他成像方法檢測。

操作步驟:

1、常規電泳、轉膜、HRP標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。

2、洗滌膜上的HRP標記二抗時,新鮮配制發光工作液:分別取等體積的溶液A和B混合,放置使之升到室溫,否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。

3、用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發光工作液充分接觸(約0.125ml /cm2膜)。室溫孵育3-5分鐘,準備立即壓片曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導致曝光條帶異常。發光過程的本質是酶促反應,使用過少的發光工作液不利反應進行,也會導致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。為達節約目的可將膜剪小,但勿降低發光液用量。

4、用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發光工作液。

5、在X光膠片暗盒內面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將雜交膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來完全包裹雜交膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內,最好蛋白帶面向上。

6、在黑暗中放入X光膠片,分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘。顯影沖洗。

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